Agarosgelelektrofores är en metod som används för att visualisera DNA samt separata fragment av DNA efter storlek ? . Elektrofores använder ett elektriskt fält för att separera elektriskt laddade molekyler . Deoxiribonukleinsyra , eller DNA , bär en negativ nettoladdning ; detta gör det möjligt att elektroforetiskt dra molekylerna mot en positivt laddad pol . Agarosgel fungerar som det medium genom vilket DNA-molekylerna vandrar som de separeras med elektrofores . Inläsning av Gel
Agarosgelelektrofores separerar DNA-molekyler baserat på storleken på de fragment som finns i provet. Små hål i toppen av gelén , som kallas ” brunnar ”, är laddade med den vätska som innehåller det DNA som skall undersökas . Denna ände av gelén placeras vid anoden , eller negativt laddade elektriska källan .
Små fragment
DNA-fragmenten dras mot katoden , eller positivt laddade elektriska källan . Eftersom molekylerna vandrar genom agarosgel , börjar de att skilja beroende på storlek . De minsta fragmenten av DNA är sådana med den lägsta molekylvikten ; dessa fragment är snabbast med att migrera mot katoden änden av gelen . Addera Större Fragment
Som fragment av DNA blir större och har högre molekylvikter , de är långsammare att röra sig genom agarosgel mot katoden ; Därför är de största fragment av DNA hittades nära anoden änden av gelen , medan de minsta fragment av DNA finns nära katoden slutet .
Visualization
DNA fragment kan visualiseras under en ultraviolett ljuskälla genom färgning av dem med en speciell kemikalie som kallas etidiumbromid. När de utsätts för UV- ljus , fragmenterat DNA kommer att visas i en stege formation , med de tyngsta och största fragment av DNA vid toppen av stegen och de lättaste , minsta DNA-fragment på botten av stegen.